近年来,免疫检讨点压迫剂(ICI)已成为微卫星高▽度担心宁(MSI-H)或错配修复缺陷(dMMR)的结直肠癌的要紧疗养权术,为晚期患者带来了新盼望。尊龙凯时人生就博然而,民众半改 观性结直肠癌患者是微 卫星安宁性(MSS)或★高效错配修复(pMMR)类型? “病毒拟态”机制是指模 仿病毒=感 触 的细▽胞流 程,通过激活○□◁…机体=的抗病毒自然免疫响应,以巩固抗肿瘤才能。这一机制常常涉及肿瘤细胞内源性的 双链RNA(dsRNA)及★其感到器。感到器识别特殊的ds RNA信号后,诱导作对素(▽IFN)响应,从而督促抗肿瘤免疫,擢升ICI疗养效益。 “病毒拟态”机制的运■△转依○赖于细胞… ○质中的形○式识别受体 (P◁○○ R R),比如 RIG◁-I样受体(RLR ),这些受体正在检测双链RNA(dsRNA)时 外现闭头◁效力。RLR识别dsRNA后□可敏捷★触 发强效作对素响应,不只巩固T细胞浸润,还擢升 了ICI疗养告成率。以是,坚持安宁的肿瘤细胞内源性dsR N△A水准大概成为 癌症 特异性疗养的靶点,以有用激活作对素响应并抬高肿瘤细□胞的免疫原性。 该推■敲揭△示了癌基因KRAS败坏 结直肠癌细□胞内源性▽dsRNA稳态,干扰“病毒拟态”效应 癌基因KRAS…的激活性突变正在超越40%的结直肠癌中显现结肠癌基因检测的效力与意旨,尊龙凯时人生就博是督促=肿瘤免疫遁逸的闭头身分。廖雯婷团队此前正在颁发于 Cancer Cell 的推敲(Cancer Cell。 2019 Ap r 15;35(4)!559-572。e7) 中欺骗改观性结直肠癌转基因小■鼠模子(iKAP)揭示了KRAS 突变通过压迫结直肠★○ 癌细胞的作对○素(I△FN) 响应来诱导免■疫◁压迫微境况,从而导致免疫检讨点耐药。正在该推敲的延续性任务中,团队不绝欺骗iKAP模子深化 探究了KRAS压迫IFN响应的机制。iKAP模子中具有可诱导的KrasG12D突变,并通过强力★霉素(Dox)实行对Apc和Trp53基因的要求○性失活。 推敲团队采用众种经典双链RNA(dsRNA)检测技巧,尊龙凯时人生就博席卷J2-免疫荧光染色、J2-免疫共 浸=淀联 合dsRNA免疫印迹、J2抗○ 体免疫○共▽浸淀联合dsRN◁A RT-PCR,以及dsRNA提取联★合RT-P…CR,涌现KRAS突变明显低浸结束直肠癌细胞内源性◁dsRNA的品貌,而压 迫KRAS突变活性则明显扩充了细胞内dsRNA的水准。这些dsRNA紧要源泉于基因组的转座元件(TE)、内源 性逆转录病毒(ERV )以★及线粒体基因。 进一步推敲注脚,KRAS突变并不影 响这些基因序列 的转录,而是通过低浸转录◁后闭键中dsRNA的 半衰期来实行低浸dsRNA品貌的。细胞内dsRNA可被◁ RNA诱导的肃静复合体(RNA-Induced Silencing Complex,RISC)降解。推敲团队还涌现,KRA■S 突变 ■不改换R ISC闭头组分DICER和AGO2的外达;敲除AGO2能明显上调KRAS突变细胞中dsR ◁NA总量,提示 KRAS突变大概通 过巩固RISC 介导的dsRNA降解来低浸肿瘤细 胞内的dsRNA水▽准。 别的,推敲团队还涌现,KRAS 突变的结直肠癌细胞对dsRNA的反映才能大△大低浸结肠癌 基因检 测的效力与意旨。这种才能的■削弱意味着这 些细胞无法有用启动抗□病 …毒免疫响应,其结果是作 对素刺激基因(ISG)的外达及 MHC-I分子的抗原提呈性能受到压迫。通过操纵合成的dsRNA雷同物poly▽ (I!C)举办实行,推敲团队瞻仰到,正在◁ …KRA S 野生型细胞 =中,poly (I!C)也许 明 显擢升IFN响应和MHC-I分子的★抗原提 呈性能。然而,正在K▽R AS★G12D突变型结直肠癌细胞 中,这些响应被衰弱。当RIG-I样受体(RLR)如R IG-I和MDA5识别■并○联合胞 内病毒RNA。